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玻连蛋白对高糖培养的人脐静脉内皮细胞的作用

发布时间:2013/06/24 23:23

作者:王玉凤  杨侠  董晓光 
    发表时间:中华实验眼科杂志  2013年1月  第31卷  第1期 
    【摘要】  
    背景  玻连蛋白是一种多功能糖蛋白。本研究组前期的动物实验表明,玻连蛋白在缺氧小鼠视网膜中表达明显增高,体外细胞实验表明高糖可以诱导人脐静脉内皮细胞人(UVECs)中玻连蛋白表达的增加。但目前尚未证实玻连蛋白在视网膜新生血管病变中的作用机制。 
    目的  观察玻连蛋白对高糖培养下人UVECs的细胞骨架结构、细胞迁移、细胞成管能力的影响。 
    方法  建立高糖培养的人UVECs体外模型,利用干扰RNA技术干扰玻连蛋白的表达。实验分为高糖组(含50mmol\L葡萄糖的DMEM培养液培养人UVECs)、阴性干扰组(对照用siRNA预干扰人UVECs后,再用含50mmol\L葡萄糖的DMEM培养液培养),在各组中分别利用Western bolt法检测玻连蛋白的表达量,免疫荧光细胞化学染色结合荧光显微镜观察人 UVECs微丝骨架,划痕法观察人UVECs的迁移情况,Matrigel法检测人UVECs的成管能力。各组的总体差异比较采用单因素方差分析,组间的多重比较采用LSD-t检验。 
    结果  Western bolt结果显示,0 h时3个组间玻连蛋白表达量的差异无统计学意义(F=1.064,P>0.05);培养24 h时高糖组、阴性干扰组、阳性干扰组中玻连蛋白的表达量依次降低,差异有统计学意义(F=15.519,P    结论  玻连蛋白可以引起高糖培养的人UVECs发生细胞骨架重塑、细胞迁移能力增加、细胞成管能力增强,可能是糖尿病视网膜病变(DR)新生血管形成的一个重要影响因素。 


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