作者：王晔  赵晓雯  谢立信  于洋 
    发表时间：中华实验眼科杂志  2012年11月  第30卷  第11期     
    【摘要】  
    背景  糖尿病是引发角膜神经病变的高危因素之一。沉默信号调控因子1(Sirt1)在糖代谢、脂代谢、胰岛素分泌调节中发挥着重要的作用，并与神经系统性疾病密切相关。目前，关于Sirt1与糖尿病性角膜神经病变的关系尚不完全清楚。 
    目的  探讨Sirt1在1型糖尿病C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜及三叉神经节中的表达及其意义，探讨Sirt1与糖尿病性角膜神经病变的关系。 
    方法  取C57BL/6-lns2Akita/J雄性小鼠与同窝出生的野生型C57BL/6小鼠各8只，分别作为1型糖尿病模型组和正常对照组。两组小鼠均在12月龄时过量麻醉处死，处死前检测空腹血糖、测体质量。取小鼠三叉神经节和角膜组织，采用苏木精-伊红染色法检测两组小鼠三叉神经节和角膜组织的组织病理学变化，用免疫组织化学法检测三叉神经节和角膜组织中Sirt1蛋白的表达和定位；用荧光定量PCR法检测Sirt1 mRNA在三又神经节和角膜组织中的表达；采用Westernblot检测两组小鼠三叉神经节和角膜组织中Sirt1蛋白的相对表达量，并进行比较。 
    结果  C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠三叉神经节细胞大小不均，细胞排列较为疏松，神经纤维排列紊乱，角膜上皮细胞层数减少，角膜变薄；野生型C57BL/6小鼠神经节细胞排列紧密，细胞形态均一，神经纤维排列整齐。免疫组织化学法检测结果显示，C57BL/6-1ns2Akita/J小鼠角膜中Sirt1蛋白的表达强度低于野生型C57BL/6小鼠。荧光定量PCR结果显示，Sirt1 mRNA在C57BL/6-lns2Akita/J小鼠角膜表达的灰度值显著低于野生型C57BL/6小鼠(0.56±0.03 VS.0.98±0.13)，差异有统计学意义(t=5.853，P=0.010)；C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠三叉神经节中Sirt1 mRNA表达的灰度值为2.45±0.8，低于野生型C57BL/6小鼠的2.51士0.22，但差异无统计学意义(t=0.587，P=0.599)。Western blot检测结果显示，C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜中Sirt1蛋白的表达显著低于野生型C57BL/6小鼠(0.780土0.017 vs.1.300±O.012)，差异有统计学意义(t=33.140，P=0.001)；两组小鼠间三叉神经节中Sirt1蛋白的表达差异无统计学意义(1.100±0.015 vs.1.110±0.017)(t=0.430，P=0.709)。 
    结论  12月龄C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜的神经和结构发育异常，Sirt1参与糖尿病角膜病变的发病，有可能是潜在的靶点分子。